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71.
结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备 总被引:8,自引:0,他引:8
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。 相似文献
72.
目的:观察用小鼠和人不同的精子抗原免疫雌小鼠对妊娠影响.方法:用小鼠2种和人4种精子抗原免疫雌小鼠,采用酶标法检测血清抗精子抗体(AsAb),观察各组小鼠妊娠率及胎仔数.结果:随着主动免疫的进行,小鼠血清AsAb显著升高( P <0.01).精子抗原免疫小鼠8周后,小鼠精子混合抗原免疫小鼠效果最好,妊娠率为零,DTT提取的人精子膜抗原和人全精子抗原免疫小鼠效果较好,妊娠率为16.7%,显著低于正常对照组的63.6%( P <0.01或 P <0.05).结论:在人精子抗原中,DTT提取的人精子膜抗原和人全精子抗原免疫雌小鼠效果最好.在小鼠精子抗原中,DTT、NP-40、Triton-100提取的小鼠精子膜混合抗原免疫雌小鼠效果最好. 相似文献
73.
EgM9蛋白免疫犬肠系膜淋巴结中抗体的免疫荧光组织化学定位 总被引:1,自引:0,他引:1
以EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬及感染原头蚴犬3个组的肠系膜淋巴结为材料,用FITC标记羊抗犬IgG扣羊抗兔IgG,分别采用一步法和三步法免疫荧光技术检测EgM蛋白免疫犬肠系膜淋巴结上的IgG和特异性IgG.结果显示,EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结组织有清楚可见的荧光点,而感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结荧光较弱.两种方法均证明,EgM蛋白免疫犬后在其肠系膜淋巴结中可以产生特异性抗体. 相似文献
74.
利用丝状霉形体山羊亚种标准株PG3制备抗原,经纯化后作为包被抗原建立了间接ELISA方法,用于检测丝状霉形体山羊亚种血清抗体。经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为1.09μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物的最佳稀释度为1∶40 000,抗原抗体最佳结合时间为1 h。判定标准为样品D490 nm值与标准阴性血清D490 nm值之比(P/N)≥3为阳性,≤2.5为阴性,介于二者之间的为可疑。重复性和稳定性试验证明,建立的间接ELISA的稳定性和重复性良好,与间接血凝试验相比,其敏感性较高。 相似文献
75.
用禽流感 (AI)H9N2油乳剂灭活疫苗免疫非免疫蛋鸡 ,并于免疫后第 0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、2 1、30d分别测定血清及卵黄中的AI血凝抑制试验 (HI)及琼脂扩散凝集试验(AGP)抗体。结果显示 ,免疫后第 7d卵黄中即可检出HI及AGP抗体 ,以后逐渐上升 ,在免疫后第 19~ 2 1d达高峰值 ,与血清的HI抗体水平接近 ,差异不显著 (P >0 .0 5 )。表明通过对鸡蛋卵黄AIV抗体检测 ,可以进行AI的疫情监测 ,但卵黄抗体检测具有一定的滞后性 相似文献
76.
77.
78.
建立的检测猪生殖与呼吸综合征(PRRS)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA),其抗原包被浓度为1.7mg/L,血清的最适稀释度为1∶100,酶标兔抗猪IgG的工作浓度为1∶2000。比较试验表明,ELISA的敏感性优于间接免疫荧光试验(IFA)。用ELISA检测1991年从美国进口猪的血清76份,阳性率为零;1995年从加拿大进口猪的血清163份,阳性率为5.52%;北京地区甲猪场的血清121份,阳性率为47.1%;北京地区乙猪场的血清43份,阳性率为41.8% 相似文献
79.
80.
米糠多糖对环磷酰胺诱导免疫抑制鸡外周血T淋巴细胞增殖活性及疫苗免疫效果的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
为探讨米糠多糖(RBS)对鸡免疫抑制状态的调节作用,将100只7日龄健康蛋用公雏鸡随机分为对照组、环磷酰胺(CTX)组和CTX RBS低、中、高3个剂量组。从7日龄起,肌肉注射CTX,1日1次,连注3 d,从10日龄起,CTX RBS组灌服RBS,1日1次,连续5 d。14日龄时各组鸡进行新城疫疫苗免疫。在10,21,28,35日龄,测定外周血T淋巴细胞增殖反应活性和ND HI抗体效价。结果显示,CTX组鸡的外周血T淋巴细胞增殖活性和ND HI抗体效价均显著低于对照组(P<0.01);CTX RBS中、高剂量组鸡外周血T淋巴细胞的增殖活性均显著高于CTX组(P<0.05或P<0.01),但低于对照组(P<0.05或P<0.01);CTX RBS中、高剂量组鸡的血清ND抗体效价均显著高于CTX组(P<0.05或P<0.01),且与对照组差异不显著(P>0.05)。证实,肌肉注射CTX可使健康雏鸡外周血T淋巴细胞的增殖反应活性和NDHI抗体效价显著降低,导致受试鸡免疫抑制;雏鸡口服一定剂量的RBS对CTX引起的细胞免疫和体液免疫抑制具有一定的拮抗作用。 相似文献